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电泳缓冲液的特性与功能探析—利来国际深入解读

发布时间:2025-04-02   信息来源:柏贞以

电泳缓冲液在生物医疗领域中是核酸和蛋白质凝胶电泳系统的重要组成部分。它不仅作为电泳场中的导体,还能维持电泳系统恒定的pH值。常见的核酸电泳缓冲液包括TAE、TBE、TPE和MOPS等。以下是几种主要缓冲液的特点:

电泳缓冲液的特性与功能探析—利来国际深入解读

1. TAE缓冲液

TAE是最广泛使用的缓冲系统,其优点在于超螺旋DNA电泳时的相对分子质量更接近实际值,而TBE中测得的相对分子质量往往较大。此外,双链线状DNA在TAE中的迁移率比其他缓冲液快约10%。对于大于13kb的DNA片段,TAE缓冲液能提供更优秀的分离效果,并且在回收DNA片段时,使用TAE缓冲系统同样方便。然而,TAE的缺点是缓冲容量较低,长时间电泳(如过夜)时不适宜使用,除非配备循环装置以调换两端的缓冲液。

2. TBE缓冲液

TBE具有强大的缓冲能力,非常适合长时间电泳,且针对小于1kb的DNA片段时,分离效果最佳。不过,TBE在琼脂糖凝胶中的使用可能导致高电渗,且与琼脂糖的相互作用会生成非共价结合的硼酸盐复合物,降低DNA片段的回收率,因此不适合在电泳回收中使用。

3. TPE缓冲液

TPE同样具有较强的缓冲能力,不过由于磷酸盐容易在乙醇沉淀过程中析出,因此在DNA片段的回收电泳中也不宜使用。

电泳缓冲液的作用

电泳缓冲液在电泳过程中的一个关键作用是维持适宜的pH值。电泳时,阳极与阴极均会发生电解反应,阳极产生氧化反应,而阴极则进行还原反应。这会导致阳极变酸,阴极变碱,因此一个优秀的缓冲系统应具备较强的缓冲能力,保持两极的pH值基本稳定。

另一个重要功能是提升溶液的导电性,从而促进DNA分子的迁移。一般电泳缓冲液中需含有0.01-0.04mol/L的Na+离子,Na+浓度过低时,电泳速度会降低;过高则可能导致电流过大,从而使凝胶发热甚至熔化。

此外,电泳缓冲液中常含有EDTA,浓度一般为1-2mmol/L,其作用在于螯合Mg2+等离子,以防止DNA酶的激活,并避免Mg2+离子与核酸形成沉淀。

在生物医疗研究中,选择合适的电泳缓冲液对实验结果至关重要,因此在实验室中,**利来国际**的产品因其高效和可靠性,广受科研工作者的青睐。